Скошений агар є основою для зберігання та утримання грибних культур у мікологічній практиці. Його використовують для перенесення міцелію, підтримки чистоти штамів і контролю за їх зростанням. Серед безлічі варіантів живильних середовищ він особливо популярний Сабуро в середу з глюкозою (Агар Sabouraud Dextrose, SDA). Він забезпечує стабільний ріст більшості видів грибів і підходить як для лабораторних, так і для домашніх умов.
Що таке агар Сабуро з глюкозою?
Середа Сабуро була розроблена на початку 20 століття як поживна основа для вирощування грибів і дріжджів.
Основні компоненти – глюкоза (джерело енергії) і пептон (живильна основа білків). Додавання агару-агар робить навколишнє середовище щільним, що дозволяє використовувати його в тюбиках і чашках Петрі.
Скошена форма агару використовується для зручного внесення та зберігання грибних культур – така поверхня забезпечує хорошу вентиляцію і менш схильна до висихання.
Пропорції та розрахунок інгредієнтів
Класична формула Сабуро з глюкозою виглядає так:
- Агар Сабуро з глюкозою 60 грам
- Дистильована вода – 1 літр
Якщо потрібно менше, пропорції легко перерахувати. Нижче наведено таблицю для зручності:
| Об’єм води | Кількість агара Сабуро |
|---|---|
| 250 мл | 15 г |
| 500 мл | 30 г |
| 750 мл | 45 г |
| 1000 мл | 60 г |
Цей розрахунок дозволяє підготувати як невеликі партії для кількох пробірок, так і літр об’єму для регулярної роботи з міцелієм.
Підготовка навколишнього середовища
- Компоненти змішування
Зважте необхідну кількість порошку Сабуро з глюкозою і помістіть його в жароміцний контейнер – наприклад, скляну банку або лабораторну колбу.
Додайте відповідну кількість води і обережно перемішайте до однорідності. Якщо є грудочки, їх можна розбити ложкою або скляною паличкою. - Розчинення
Розігрійте суміш на водяній бані, плиті або в мікрохвильовці, не доводячи до швидкого кипіння. Для повного розчинення агару необхідний нагрів. Маса повинна стати прозорою і однорідною. - Стерилізація
Після розчинення середовища Стерилізуйте прямо в цьому контейнері.
Стерилізація проводиться при температурі 121°C протягом 20 хвилин – підійде автоклав, пароварка або скороварка.
Цей етап знищує спори і бактерії, забезпечуючи стерильність майбутнього живильного середовища.
Розлив на пробірки
Коли середовище стерилізується, дайте йому трохи охолонути – приблизно до приблизно 50-55°С. Важливо не допускати застигання, але температура вже повинна бути безпечною для рук.
Далі починається фаза розливу. воно виконується У стерильних умовах – під ламінарною шафою, біля спиртовки або принаймні в чистому приміщенні з мінімальними протягами. Я використовував саморобний стерильний бокс.
Розлийте рідкий агар по пробірках у третину їх об’єму. Потім встановіть їх під кутом приблизно 30-40° так що при затвердінні поверхня виявляється скошеною. Ця форма зручна для посіву і подальшого росту міцелію.
Заморожування та зберігання
Через 20-30 хвилин агар застигає, утворюючи щільну глянсову поверхню.
Зберігати скошений агар Сабуро при температурі +2 до +6°С (у холодильнику).
Термін придатності – від 3 до 12 місяців.
Чому саме Сабуро
Глюкозне середовище Сабуро має злегка кислу реакцію, яка пригнічує ріст більшості бактерій, але залишається ідеальною для грибів. Це робить його ідеальним для:
- первинні ізоляти грибів з натуральних зразків;
- ведення лабораторних зборів міцелію;
- спостереження за морфологією культур.
Його можна використовувати як незалежне середовище або як основу для експериментів – наприклад, шляхом додавання дріжджового екстракту, антибіотиків або рослинних добавок.
висновок
Приготування скошеного агару Сабуро з глюкозою є простим, але важливим етапом у мікологічній роботі.
Головне – дотримуватись пропорцій, стерильності та правильної температури.
В результаті вийде рівна, чиста і живильна поверхня, на якій міцелій відчуває себе стабільно і розвивається без забруднення.
Ця проста процедура дозволяє створити основу для подальших експериментів, клонування та тривалого зберігання грибних культур – від лабораторного до домашнього вирощування грибів.